Nauja autologinių ląstelių terapija, naudojant trombocitais turtingą plazmą (PRP), gali atlikti pagalbinį vaidmenį įvairiuose regeneracinės medicinos gydymo planuose.Pasaulinis nepatenkintas audinių atstatymo strategijų poreikis, skirtas gydyti pacientus, sergančius raumenų ir kaulų sistemos (MSK) bei stuburo ligomis, osteoartritu (OA) ir lėtinėmis sudėtingomis bei ugniai atspariomis žaizdomis.PRP terapija pagrįsta tuo, kad trombocitų augimo faktorius (PGF) palaiko žaizdų gijimą ir taisymo kaskadą (uždegimą, proliferaciją ir remodeliavimąsi).Atlikus tyrimus su žmonėmis, in vitro ir gyvūnais, buvo įvertinta daugybė skirtingų PRP formų.Tačiau in vitro ir tyrimų su gyvūnais rekomendacijos dažniausiai lemia skirtingus klinikinius rezultatus, nes neklinikinių tyrimų rezultatus ir metodų rekomendacijas sunku perkelti į žmogaus klinikinį gydymą.Pastaraisiais metais buvo padaryta pažanga suprantant PRP technologijos ir biologinių agentų sampratą, buvo pasiūlytos naujos tyrimų instrukcijos ir naujos indikacijos.Šioje apžvalgoje aptarsime naujausią PRP paruošimo ir sudėties pažangą, įskaitant trombocitų dozę, leukocitų aktyvumą ir įgimtą bei adaptyvų imuninį reguliavimą, 5-hidroksitriptamino (5-HT) poveikį ir skausmo malšinimą.Be to, aptarėme PRP mechanizmą, susijusį su uždegimu ir angiogeneze audinių taisymo ir regeneracijos metu.Galiausiai apžvelgsime kai kurių vaistų poveikį PRP veiklai.
Autologinė trombocitais turtinga plazma (PRP) yra skystoji autologinio periferinio kraujo dalis po gydymo, o trombocitų koncentracija yra didesnė už pradinę.PRP terapija įvairioms indikacijoms taikoma daugiau nei 30 metų, todėl labai domisi autogeninio PRP potencialu regeneracinėje medicinoje.Terminas ortopedinis biologinis agentas neseniai buvo pradėtas gydyti raumenų ir kaulų sistemos (MSK) ligoms gydyti ir pasiekė daug žadančių rezultatų heterogeninių bioaktyvių PRP ląstelių mišinių regeneracijos srityje.Šiuo metu PRP terapija yra tinkamas gydymo būdas, turintis klinikinę naudą, o pacientų rezultatai teikia vilčių.Tačiau pacientų rezultatų nenuoseklumas ir naujos įžvalgos sukėlė iššūkių klinikiniam PRP pritaikymui.Viena iš priežasčių gali būti PRP ir PRP tipo sistemų skaičius ir kintamumas rinkoje.Šie prietaisai skiriasi PRP surinkimo kiekiu ir paruošimo schema, todėl pasižymi unikaliomis PRP charakteristikomis ir biologiniais agentais.Be to, nesant sutarimo dėl PRP paruošimo schemos standartizavimo ir išsamios ataskaitos apie biologinius veiksnius klinikinėje praktikoje, ataskaitų rezultatai buvo nenuoseklūs.Buvo atlikta daug bandymų apibūdinti ir klasifikuoti PRP arba kraujo produktus regeneracinės medicinos srityse.Be to, ortopediniams ir in vitro kamieninių ląstelių tyrimams buvo pasiūlyti trombocitų dariniai, tokie kaip žmogaus trombocitų lizatai.
Vienas pirmųjų komentarų apie PRP buvo paskelbtas 2006 m. Šioje apžvalgoje pagrindinis dėmesys skiriamas trombocitų funkcijai ir veikimo būdui, PRP poveikiui kiekvienam gijimo kaskados etapui ir pagrindiniam trombocitų augimo faktoriaus vaidmeniui. esant įvairioms PRP indikacijoms.Ankstyvajame PRP tyrimų etape pagrindinis PRP arba PRP-gelis buvo domimasi kelių trombocitų augimo faktorių (PGF) egzistavimu ir specifinėmis funkcijomis.
Šiame darbe plačiai aptarsime naujausią skirtingų PRP dalelių struktūrų ir trombocitų ląstelių membranų receptorių raidą bei jų poveikį įgimtai ir adaptyviai imuninės sistemos imuninei reguliacijai.Be to, bus išsamiai aptartas atskirų ląstelių, kurios gali egzistuoti PRP gydymo buteliuke, vaidmuo ir jų įtaka audinių regeneracijos procesui.Be to, bus aprašyta naujausia pažanga suprantant PRP biologinius agentus, trombocitų dozę, specifinių baltųjų kraujo kūnelių specifinį poveikį ir PGF koncentracijos bei citokinų poveikį mezenchiminių kamieninių ląstelių (MSC) mitybiniam poveikiui, įskaitant PRP, nukreiptą į skirtingus. ląstelių ir audinių aplinka po ląstelės signalo perdavimo ir parakrininis poveikis.Panašiai aptarsime PRP mechanizmą, susijusį su uždegimu ir angiogeneze audinių taisymo ir regeneracijos metu.Galiausiai apžvelgsime PRP nuskausminamąjį poveikį, kai kurių vaistų poveikį PRP veiklai, PRP ir reabilitacijos programų derinį.
Pagrindiniai klinikinės trombocitais praturtintos plazmos terapijos principai
PRP preparatai vis populiaresni ir plačiai naudojami įvairiose medicinos srityse.Pagrindinis mokslinis PRP gydymo principas yra tas, kad koncentruotų trombocitų injekcija į pažeistą vietą gali inicijuoti audinių atstatymą, naujo jungiamojo audinio sintezę ir kraujotakos atstatymą, išskiriant daugybę biologiškai aktyvių faktorių (augimo faktorių, citokinų, lizosomų) ir adhezijos baltymai, atsakingi už hemostatinės kaskados reakcijos inicijavimą.Be to, plazmos baltymų (pvz., fibrinogeno, protrombino ir fibronektino) yra plazmos komponentuose, kuriuose mažai trombocitų (PPP).PRP koncentratas gali paskatinti hiperfiziologinį augimo faktorių išsiskyrimą, kad būtų pradėtas lėtinių sužalojimų gijimas ir pagreitintas ūminio sužalojimo atstatymo procesas.Visuose audinių atstatymo proceso etapuose įvairūs augimo faktoriai, citokinai ir vietinio veikimo reguliatoriai skatina pagrindines ląstelių funkcijas per endokrininius, parakrininius, autokrininius ir endokrininius mechanizmus.Pagrindiniai PRP privalumai yra jo saugumas ir išradinga dabartinės komercinės įrangos paruošimo technologija, kurią naudojant galima paruošti biologinius agentus, kurie gali būti plačiai naudojami.Svarbiausia, kad, palyginti su įprastais kortikosteroidais, PRP yra autogeninis produktas, neturintis žinomo šalutinio poveikio.Tačiau nėra aiškaus reguliavimo dėl injekcinio PRP sudėties formulės ir sudėties, o PRP sudėtis labai keičia trombocitus, baltųjų kraujo kūnelių (WBC) kiekį, raudonųjų kraujo kūnelių (RBC) taršą ir PGF koncentraciją.
PRP terminologija ir klasifikacija
Jau kelis dešimtmečius PRP produktų, naudojamų audinių atstatymui ir regeneracijai skatinti, kūrimas buvo svarbi biomedžiagų ir vaistų mokslo tyrimų sritis.Audinių gijimo kaskadoje dalyvauja daug dalyvių, įskaitant trombocitus ir jų augimo faktorius bei citokinų granules, baltuosius kraujo kūnelius, fibrino matricą ir daugelį kitų sinergetinių citokinų.Šiame kaskadiniame procese vyks sudėtingas krešėjimo procesas, įskaitant trombocitų aktyvavimą ir vėlesnį tankinimą bei α- trombocitų dalelių turinio išsiskyrimą, fibrinogeno (išskiriamo trombocitų arba laisvo plazmoje) agregaciją į fibrino tinklą ir susidarymą. dėl trombocitų embolijos.
„Universalus“ PRP imituoja gijimo pradžią
Iš pradžių terminas „trombocitais praturtinta plazma (PRP)“ buvo vadinamas trombocitų koncentratu, naudojamu kraujo perpylimo medicinoje, ir jis vartojamas iki šiol.Iš pradžių šie PRP produktai buvo naudojami tik kaip fibrino audinių klijai, o trombocitai buvo naudojami tik stipresnei fibrino polimerizacijai palaikyti, siekiant pagerinti audinių sandarumą, o ne kaip gijimo stimuliatorius.Po to PRP technologija buvo sukurta taip, kad imituotų gijimo kaskados pradžią.Vėliau PRP technologija buvo apibendrinta pagal jos gebėjimą įvesti ir išleisti augimo faktorius į vietinę mikroaplinką.Šis entuziazmas dėl PGF pristatymo dažnai slepia svarbų kitų komponentų vaidmenį šiuose kraujo dariniuose.Šis entuziazmas dar labiau sustiprėja dėl mokslinių duomenų trūkumo, mistiškų įsitikinimų, komercinių interesų ir standartizavimo bei klasifikavimo stokos.
PRP koncentrato biologija yra tokia pat sudėtinga kaip pats kraujas ir gali būti sudėtingesnis nei tradiciniai vaistai.PRP produktai yra gyvos biomedžiagos.Klinikinio PRP taikymo rezultatai priklauso nuo būdingų, universalių ir adaptyvių paciento kraujo ypatybių, įskaitant įvairius kitus ląstelinius komponentus, kurie gali būti PRP mėginyje, ir receptoriaus vietinės mikroaplinkos, kuri gali būti ūmios arba lėtinės.
Paini PRP terminologijos ir siūlomos klasifikavimo sistemos santrauka
Daugelį metų praktikus, mokslininkus ir įmones kamuoja pirminis PRP gaminių ir skirtingų terminų nesusipratimas bei trūkumai.Kai kurie autoriai apibrėžė PRP kaip tik trombocitus, o kiti nurodė, kad PRP taip pat yra raudonųjų kraujo kūnelių, įvairių baltųjų kraujo kūnelių, fibrino ir padidintos koncentracijos bioaktyvių baltymų.Todėl klinikinėje praktikoje buvo įdiegta daug skirtingų PRP biologinių agentų.Apmaudu, kad literatūroje dažniausiai trūksta išsamaus biologinių veiksnių aprašymo.Nesėkmingas gaminių paruošimo standartizavimas ir vėlesnis klasifikavimo sistemos kūrimas paskatino naudoti daugybę PRP produktų, apibūdinamų skirtingais terminais ir santrumpos.Nenuostabu, kad PRP preparatų pokyčiai lemia nenuoseklius pacientų rezultatus.
Kingsley pirmą kartą pavartojo terminą „trombocitais turtinga plazma“ 1954 m. Po daugelio metų Ehrenfest ir kt.Buvo pasiūlyta pirmoji klasifikavimo sistema, pagrįsta trimis pagrindiniais kintamaisiais (trombocitų, leukocitų ir fibrino kiekiu), o daugelis PRP produktų buvo suskirstyti į keturias kategorijas: P-PRP, LR-PRP, grynas trombocitais turtingas fibrinas (P-PRF) ir leukocitai. turtingas PRF (L-PRF).Šie gaminiai ruošiami visiškai automatine uždara sistema arba rankiniu protokolu.Tuo tarpu Everts ir kt.Pabrėžta baltųjų kraujo kūnelių paminėjimo svarba PRP preparatuose.Jie taip pat rekomenduoja vartoti atitinkamą terminiją neaktyvioms arba aktyvintoms PRP preparatų ir trombocitų gelio versijoms apibūdinti.
Delong ir kt.pasiūlė PRP klasifikavimo sistemą, vadinamą trombocitais, aktyvuotais baltaisiais kraujo kūneliais (PAW), pagrįstą absoliučiu trombocitų skaičiumi, įskaitant keturis trombocitų koncentracijos diapazonus.Kiti parametrai apima trombocitų aktyvatorių naudojimą ir baltųjų kraujo kūnelių (ty neutrofilų) buvimą arba nebuvimą.Mishra ir kt.Siūloma panaši klasifikavimo sistema.Po kelerių metų Mautneris ir jo kolegos aprašė sudėtingesnę ir išsamesnę klasifikavimo sistemą (PLRA).Autorius įrodė, kad svarbu apibūdinti absoliutų trombocitų skaičių, baltųjų kraujo kūnelių kiekį (teigiamas ar neigiamas), neutrofilų procentą, RBC (teigiamas ar neigiamas) ir ar naudojamas egzogeninis aktyvinimas.2016 metais Magalon ir kt.Paskelbta DEPA klasifikacija, pagrįsta trombocitų injekcijos doze, gamybos efektyvumu, gauto PRP grynumu ir aktyvavimo procesu.Vėliau Lana ir jos kolegos pristatė MARSPILL klasifikavimo sistemą, daugiausia dėmesio skiriant periferinio kraujo mononuklearinėms ląstelėms.Neseniai Mokslinės standartizacijos komitetas pasisakė už Tarptautinės trombozės ir hemostazės draugijos klasifikavimo sistemos naudojimą, kuris yra pagrįstas bendromis rekomendacijomis standartizuoti trombocitų produktų naudojimą regeneracinėje medicinoje, įskaitant šaldytus ir atšildytus trombocitų produktus.
Remiantis įvairių praktikų ir tyrėjų pasiūlyta PRP klasifikavimo sistema, daugelis nesėkmingų bandymų standartizuoti PRP gamybą, apibrėžimą ir formulę, kurią turi naudoti gydytojai, gali padaryti teisingą išvadą, kuri greičiausiai nepasikartos per artimiausius kelerius metus. , klinikinių PRP produktų technologija toliau tobulėja, o moksliniai duomenys rodo, kad skirtingoms patologijoms gydyti tam tikromis sąlygomis reikalingi skirtingi PRP preparatai.Todėl tikimės, kad idealios PRP gamybos parametrai ir kintamieji ateityje augs.
Vykdomas PRP paruošimo metodas
Remiantis PRP terminologija ir produkto aprašymu, skirtingoms PRP formulėms išleidžiamos kelios klasifikavimo sistemos.Deja, nėra sutarimo dėl išsamios PRP ar bet kurio kito autologinio kraujo ir kraujo produktų klasifikavimo sistemos.Idealiu atveju klasifikavimo sistemoje reikėtų atkreipti dėmesį į įvairias PRP charakteristikas, apibrėžimus ir atitinkamą nomenklatūrą, susijusią su konkrečiomis ligomis sergančių pacientų gydymo sprendimais.Šiuo metu ortopedijos taikymas PRP skirsto į tris kategorijas: gryną trombocitų turintį fibriną (P-PRF), leukocitų turintį PRP (LR-PRP) ir leukocitų trūkumą turintį PRP (LP-PRP).Nors LR-PRP ir LP-PRP kategorijos yra konkretesnės nei bendras PRP produkto apibrėžimas, akivaizdžiai trūksta baltųjų kraujo kūnelių kiekio specifiškumo.Dėl savo imuninių ir šeimininko gynybos mechanizmų baltieji kraujo kūneliai labai paveikė vidinę lėtinių audinių ligų biologiją.Todėl PRP biologiniai agentai, kuriuose yra specifinių baltųjų kraujo kūnelių, gali žymiai skatinti imuninį reguliavimą ir audinių atstatymą bei regeneraciją.Tiksliau sakant, limfocitų gausu PRP, gaminančių į insuliną panašų augimo faktorių ir palaikančių audinių remodeliavimąsi.
Monocitai ir makrofagai atlieka pagrindinį vaidmenį imuninės sistemos reguliavimo procese ir audinių atstatymo mechanizme.Neutrofilų svarba PRP yra neaiški.LP-PRP buvo nustatytas kaip pirmasis PRP preparatas sisteminiu vertinimu, siekiant efektyvių sąnarių OA gydymo rezultatų.Tačiau Lana ir kt.Prieštaraujama LP-PRP naudojimui gydant kelio OA, o tai rodo, kad specifiniai baltieji kraujo kūneliai atlieka svarbų vaidmenį uždegiminiame procese prieš audinių regeneraciją, nes išskiria uždegimą skatinančias ir priešuždegimines molekules.Jie nustatė, kad neutrofilų ir aktyvuotų trombocitų derinys turėjo daugiau teigiamo poveikio nei neigiamas poveikis audinių atstatymui.Jie taip pat atkreipė dėmesį į tai, kad monocitų plastiškumas yra svarbus neuždegiminei ir taisant audinių atstatymo funkciją.
Klinikinių tyrimų PRP paruošimo schemos ataskaita yra labai nenuosekli.Daugumoje paskelbtų tyrimų nebuvo pasiūlytas PRP paruošimo metodas, reikalingas schemos pakartojamumui.Nėra aiškaus sutarimo tarp gydymo indikacijų, todėl sunku palyginti PRP produktus ir su jais susijusius gydymo rezultatus.Daugeliu atvejų trombocitų koncentracijos terapija priskiriama terminui „PRP“, net ir esant tai pačiai klinikinei indikacijai.Kai kuriose medicinos srityse (pvz., OA ir tendinozės) padaryta pažanga suprantant PRP preparatų pokyčius, pristatymo būdus, trombocitų funkciją ir kitus PRP komponentus, turinčius įtakos audinių atstatymui ir audinių regeneracijai.Tačiau reikia atlikti tolesnius tyrimus, kad būtų pasiektas sutarimas dėl PRP terminijos, susijusios su PRP biologiniais agentais, siekiant visiškai ir saugiai gydyti tam tikras patologijas ir ligas.
PRP klasifikavimo sistemos būklė
Autologinės PRP bioterapijos taikymą vargina PRP preparatų nevienalytiškumas, nenuoseklus pavadinimų suteikimas ir prastas įrodymais pagrįstų gairių standartizavimas (tai yra, yra daug paruošimo metodų klinikinio gydymo buteliukams gaminti).Galima prognozuoti, kad PRP ir susijusių produktų absoliutus PRP kiekis, grynumas ir biologinės savybės labai skiriasi ir turi įtakos biologiniam efektyvumui bei klinikinių tyrimų rezultatams.Pasirinkus PRP paruošimo įrenginį, pateikiamas pirmasis pagrindinis kintamasis.Klinikinėje regeneracinėje medicinoje praktikai gali naudoti dvi skirtingas PRP paruošimo įrangą ir metodus.Preparatui naudojamas standartinis kraujo ląstelių separatorius, kuris veikia su visu paties surinktu krauju.Šis metodas naudoja nepertraukiamo srauto centrifugos būgno arba disko atskyrimo technologiją ir kietos bei minkštos centrifugos etapus.Dauguma šių prietaisų naudojami chirurgijoje.Kitas būdas – naudoti gravitacinę išcentrinę technologiją ir įrangą.Didelės G jėgos centrifugavimas naudojamas geltonajam ESR sluoksniui atskirti nuo kraujo vieneto, kuriame yra trombocitų ir baltųjų kraujo kūnelių.Šie koncentravimo prietaisai yra mažesni nei kraujo ląstelių separatoriai ir gali būti naudojami šalia lovos.Skirtumas ģ – jėga ir centrifugavimo laikas lemia reikšmingus izoliuotų trombocitų išeigos, koncentracijos, grynumo, gyvybingumo ir aktyvuotos būklės skirtumus.Pastarojoje kategorijoje galima naudoti daug rūšių komercinės PRP paruošimo įrangos, todėl toliau keičiasi produkto sudėtis.
Sutarimo dėl PRP paruošimo metodo ir patvirtinimo trūkumas ir toliau lemia PRP gydymo nenuoseklumą, o PRP paruošimas, mėginių kokybė ir klinikiniai rezultatai labai skiriasi.Esama komercinė PRP įranga buvo patikrinta ir užregistruota pagal patentuoto gamintojo specifikacijas, kurios išsprendžia skirtingus šiuo metu turimos PRP įrangos kintamuosius.
Supraskite trombocitų dozę in vitro ir in vivo
PRP ir kitų trombocitų koncentratų terapinis poveikis atsiranda dėl įvairių audinių atstatymo ir regeneracijos veiksnių išsiskyrimo.Po trombocitų aktyvavimo trombocitai suformuos trombocitų trombą, kuris bus laikina ekstraląstelinė matrica, skatinanti ląstelių dauginimąsi ir diferenciaciją.Todėl teisinga manyti, kad didesnė trombocitų dozė padidins vietinę trombocitų bioaktyvių veiksnių koncentraciją.Tačiau koreliacija tarp dozės ir trombocitų koncentracijos bei išsiskyrusio trombocitų bioaktyvaus augimo faktoriaus ir vaisto koncentracijos gali būti nekontroliuojama, nes yra reikšmingų skirtumų tarp atskirų pacientų pradinio trombocitų skaičiaus, taip pat skiriasi PRP paruošimo metodai.Panašiai keletas trombocitų augimo faktorių, dalyvaujančių audinių atstatymo mechanizme, yra PRP plazmoje (pavyzdžiui, kepenų augimo faktorius ir į insuliną panašus augimo faktorius 1).Todėl didesnė trombocitų dozė neturės įtakos šių augimo faktorių atstatymo potencialui.
In vitro PRP tyrimai yra labai populiarūs, nes šiuose tyrimuose galima tiksliai kontroliuoti skirtingus parametrus ir greitai gauti rezultatus.Keletas tyrimų parodė, kad ląstelės reaguoja į PRP priklausomai nuo dozės.Nguyenas ir Phamas parodė, kad labai didelės GF koncentracijos nebūtinai buvo palankios ląstelių stimuliacijos procesui, o tai gali būti priešinga.Kai kurie in vitro tyrimai parodė, kad didelė PGF koncentracija gali turėti neigiamą poveikį.Viena iš priežasčių gali būti ribotas ląstelių membranos receptorių skaičius.Todėl, kai PGF lygis yra per didelis, palyginti su turimais receptoriais, jie turės neigiamą poveikį ląstelių funkcijai.
Trombocitų koncentracijos duomenų reikšmė in vitro
Nors in vitro tyrimai turi daug privalumų, jie turi ir tam tikrų trūkumų.In vitro dėl nuolatinės sąveikos tarp daugelio skirtingų ląstelių tipų bet kuriame audinyje dėl audinių struktūros ir ląstelinio audinio, sunku daugintis in vitro dvimatėje vienos kultūros aplinkoje.Ląstelių tankis, galintis paveikti ląstelės signalo kelią, paprastai yra mažesnis nei 1% audinių būklės.Dviejų dimensijų kultūros lėkštelės audinys neleidžia ląstelėms patekti į ekstraląstelinę matricą (ECM).Be to, dėl tipinės auginimo technologijos kaupsis ląstelių atliekos ir nuolat sunaudos maistines medžiagas.Todėl in vitro kultūra skiriasi nuo bet kokios pastovios būsenos, audinių aprūpinimo deguonimi ar staigios auginimo terpės keitimo, todėl buvo paskelbti prieštaringi rezultatai, lyginant klinikinį PRP poveikį su specifinių ląstelių, audinių tipų ir trombocitų tyrimu in vitro. koncentracijos.Graziani ir kt.Nustatyta, kad in vitro didžiausias poveikis osteoblastų ir fibroblastų proliferacijai buvo pasiektas, kai PRP trombocitų koncentracija buvo 2,5 karto didesnė už pradinę vertę.Priešingai, Parko ir kolegų pateikti klinikiniai duomenys parodė, kad po stuburo suliejimo PRP trombocitų lygį reikia padidinti daugiau nei 5 kartus nei pradinis, kad būtų gauti teigiami rezultatai.Taip pat buvo pranešta apie panašius prieštaringus rezultatus tarp sausgyslių proliferacijos in vitro ir klinikinių rezultatų.
(Šio straipsnio turinys yra perspausdintas ir mes nesuteikiame jokių aiškių ar numanomų garantijų dėl šiame straipsnyje pateikto turinio tikslumo, patikimumo ar išsamumo ir nesame atsakingi už šiame straipsnyje pateiktas nuomones, supraskite.)
Paskelbimo laikas: 2023-01-01